utb-Shoputb-Shop

0 Artikel zum Warenkorb

Sie haben keine Artikel im Warenkorb.

Gesamtsumme 0,00 €
Zwischensumme 0,00 €

Molekularbiologische Methoden 2.0

von Reinard, Thomas Fach: Biologie/ Ökologie;

Von den Grundlagen der Laborarbeit über aktuelle Methoden und Verfahren bis zum Fortgeschrittenenwissen

Die Molekularbiologie hat sich in den letzten Jahren rasant weiterentwickelt. Vor wenigen Jahren noch völlig unbekannte Technologien und Verfahren, wie die Modulare Klonierung, PCR-basierte Klonierungen oder das Gibson Assembly gelten heute als Standard.

Dies ist das bislang einzige Methodenbuch, das die neuen, inzwischen weit verbreiteten Verfahren, wie Gibson Assembly, Golden Gate, MoClo und Genom Editierung, beschreibt.

Diese und viele andere zukunftsweisenden Verfahren wurden aussagekräftig illustriert, zahlreiche Wissensboxen, Tipps und Protokolle machen den Titel zum perfekten Praxisbegleiter. Ideal für Bachelor- und Master-Studierende und für Berufspraktiker!
Erweitern/ reduzieren Zusatzinformationen

Verfügbare Formate

Print-Ausgabe *(verfügbar)
34,99 €
2. vollst. überarb. u. erw. Aufl.
Online-Zugang **(verfügbar)
27,99 €
2. vollst. überarb. u. erw. Aufl.
Buch und Online-Zugang nur
41,99 €
AGB / Widerrufsbelehrung

Beim Kombi-Angebot sparen Sie 33% gegenüber dem Preis der Einzelprodukte!

Was ist der »Online-Zugang«?

* Print-Ausgabe inkl. 7% Mehrwertsteuer ** Online-Zugang inkl. 19% Mehrwertsteuer Kostenlose Lieferung innerhalb Deutschlands ab einem Bestellwert von 10,- €. Details

Details
ISBN 9783825287429
UTB-Titelnummer 8449
Auflagennr. 2. vollst. überarb. u. erw. Aufl.
Erscheinungsjahr 2018
Erscheinungsdatum 10.09.2018
Einband Kartoniert
Formate UTB L (17 x 24 cm)
Originalverlag Ulmer
Umfang 328 S., 145 farb. Abb., 50 Tab.
Zusatzmaterial
Inhalt
Vorwort zur 1. Auflage 12
Vorwort zur 2. Auflage 13
1 Das Leben und seine Bestandteile
1.1 Der Aufbau von DNA und RNA 17
1.2 Der genetische Code 20
1.3 Die Gene 22
1.3.1 Die Genstruktur in Prokaryoten 22
1.3.2 Genstruktur in Eukaryoten 24
1.4 Proteine 26
1.5 Die Zelle 30
2 Grundlagen der Arbeit im Labor
2.1 Wasser 34
2.2 Messung des pH-Werts 35
2.3 Puffer 36
2.4 Waagen 36
2.5 Mikropipetten 38
2.6 Gefäße im Labor 40
2.7 Zentrifugen 41
2.8 Mischen und Konzentrieren 44
2.8.1 Konzentrieren 45
2.8.2 Pufferwechsel 45
2.9 Probenlagerung 46
2.10 Steriles Arbeiten 46
2.11 Geräte für den Aufschluss von Geweben 49
2.12 Pflege und Aufzucht von Escherichia coli 51
2.12.1 Nährmedien 52
2.12.2 Antibiotika 53
2.12.3 Lagerung von Bakterien 55
3 Aufreinigung von Nukleinsäuren
3.1 Gegenspieler erfolgreicher DNA- und RNA-Isolationen 59
3.1.1 Nukleasen 59
3.1.2 Scherkräfte 60
3.1.3 Chemische Verunreinigungen 60
3.1.4 EDTA und zweiwertige Ionen: das Yin und Yang der Molekularbiologie 61
3.2 Extraktion von Nukleinsäuren 62
3.3 Die weitere Aufreinigung der DNA 64
3.3.1 Phenolextraktion 64
3.3.2 Ethanolfällung 65
3.3.3 Isopropanolfällung 67
3.3.4 PEG-Fällung 68
3.3.5 Entfernen von Polysacchariden mit CTAB 68
3.3.6 Tropfendialyse 68
3.4 Silica Matrices 69
3.4.1 Von Nukleinsäuren und Silica Matrices 69
3.4.2 Übersicht über den Einsatz von Kits 70
3.5 Ausgewählte DNA Aufreinigungsverfahren 71
3.5.1 Die Plasmidpräparation aus E. coli 71
3.5.2 Die Isolation von DNA aus Pflanzen mit CTAB 72
3.5.3 Isolation von DNA aus Blut oder Zellkulturen 74
3.5.4 Isolation hochmolekularer DNA 75
3.6 Die Isolation von RNA 76
3.7 Tipps zum Erzielen hoher Ausbeuten bei der Isolation von Nukleinsäuren 78
3.8 Quantifizierung von Nukleinsäuren 79
3.8.1 DNA-Bestimmung im Photometer 79
3.8.2 Konzentrationsbestimmung mittels optischer Dichte 81
4 Polymerase- Kettenreaktion
4.1 Prinzip der Polymerase- Kettenreaktion 85
4.2 Die Komponenten der PCR 86
4.2.1 Die Ausgangs-DNA 86
4.2.2 Thermostabile DNA-Polymerasen 86
4.2.3 Puffer, Magnesium und dNTPs 89
4.2.4 Primer 91
4.3 Geräte für die PCR 93
4.4 Die Standard-PCR 94
4.5 Ausgewählte PCR-Methoden 94
4.5.1 Two-Step PCR 94
4.5.2 Gradienten-PCR und Touch-Down PCR 96
4.5.3 Nested PCR 97
4.5.4 Multiplex PCR 97
4.5.5 Einführen von Restriktionsschnittstellen 98
4.5.6 Reverse Transkriptions-PCR (RT-PCR) 99
4.5.7 Kolonie-PCR 102
4.5.8 Quantitative PCR 103
4.6 Anwendungen der PCR 105
4.7 Optimierung der PCR-Reaktion 105
5 Klonieren für Einsteiger
5.1 Restriktionsenzyme 109
5.1.1 Restriktionsenzyme des Typs II 110
5.1.2 Restriktionsenzyme im Labor 113
5.1.3 Methylasen und Typ IIM-Enzyme 115
5.1.4 Typ IIS-Enzyme 116
5.2 Ligation 116
5.3 (De)Phosphorylierung von DN 118
5.3.1 Dephosphorylierung 118
5.3.2 Phosphorylierung 119
5.4 Enzyme für spezielle Aufgaben 121
5.5 Die Transformation von E. coli 121
5.6 Der Weg zum klonierten Gen 123
5.7 Der ungerichtete Einbau einer amplifizierten DNA in einen Vektor 123
5.7.1 Die Klonierung über eine Restriktionsstelle 124
5.7.2 TA-Klonierung und TOPO-Cloning 125
5.7.3 Klonierung in ein Letal-Plasmid 126
5.7.4 Zyklische Blunt End Klonierung 126
5.8 Der gerichtete Einbau von DNA in einen Vektor 127
5.9 Wenn es mal nicht klappt ... 129
6 Vektoren
6.1 Plasmide 132
6.2 Klonierungsplasmide 135
6.2.1 Blau-Weiß-Screening 135
6.2.2 Letalvektoren 138
6.3 Expressionsplasmide 139
6.3.1 Promotoren für Expressionsvektoren 140
6.3.2 Weitere regulative Sequenzen 141
6.3.3 Expression in das Periplasma 141
6.3.4 Einschlusskörperchen [Inclusion Bodies] 141
6.3.5 Tag-Sequenzen 142
6.4 Reportergene 142
6.5 Phagen 146
6.6 Phagemide 147
6.7 Shuttle-Vektoren 147
6.8 Künstliche Chromosome: YACs, BACs und PACs 148
6.9 Hefen als Klonierungs- und Expressionssystem 149
6.9.1 Hefe als Modellorganismus 149
6.9.2 Vektoren für Hefe 151
6.9.3 Transformation von Hefe 152
6.10 Pflanzen als Bioreaktoren 152
6.10.1 Die Transformation von Pflanzen 153
6.10.2 Transiente Transformationsverfahren 155
6.11 Die Transformation von Säugetieren und tierischen Zellkulturen 156
6.11.1 Säugetiere als Modellorganismen 156
6.11.2 Säuger-Zellkulturen 157
6.11.3 Vektoren für tierische Zellen 158
6.11.4 Transfektion tierischer Zellkulturen 159
7 Elektrophorese und Hybridisierung von Nukleinsäuren
7.1 Agarose-Gelelektrophorese von DNA 162
7.2. Die Detektion der DNA im Gel 167
7.3 Präparative Agarosegele 169
7.4 Auftrennen von RNA im Agarosegel 170
7.5 Fehlersuche bei Agarose-Gelelektrophorese 170
7.6 Hybridisierung von Nukleinsäuren 171
7.6.1 Southern und Northern Blot 173
7.6.2 Herstellung der Sonde und Hybridisierung 174
7.7 Microarrays 174
8 Fortgeschrittene Klonierung
8.1 Klonsammlungen und synthetische Gene 179
8.1.1 Klonsammlungen 180
8.1.2 Synthetische Gene und Genfragmente 180
8.2 Rekombinase-basierte Klonierung 181
8.3 Mutageneseverfahren 183
8.4 PCR-basierte Klonierungsverfahren: RF-Cloning und oePCR 186
8.5 Synthetische Biologie 188
8.6 Biobricks 189
8.7 Nahtlose Klonierungsverfahren 189
8.7.1 Golden Gate Klonierung 190
8.7.2 Cut-Ligation Verfahren 191
8.7.3 Multiple Insertionen mittels Golden Gate Klonierung 192
8.7.4 Golden Gate basierte Tool Kits am Beispiel des MoClo Kits 192
8.8 Gibson Assembly 195
8.9 Vergleich der Verfahren 198
9 Proteinaufreinigung
9.1 Homogenisation 203
9.1.1 Proteasen 204
9.1.2 Phenoloxidasen 206
9.2 Extraktion von Proteinen 207
9.2.1 Homogenisationspuffer 207
9.2.2 Abtrennen von Zell- und Gewebetrümmern 208
9.2.3 Fraktionierung des Rohextrakts 208
9.3 Dialyse und Konzentrierung 211
9.4 Weitere Aufreinigungsschritte 212
9.4.1 Chromatographie 213
9.4.2 Chromatographische Trennprinzipien 215
9.4.3 Magnetic Beads 216
9.5 Quantifizierung von Proteinen 217
9.5.1 Proteinbestimmung nach Bradford 217
9.5.2 BCA-Test 219
9.5.3 Welchen Test benutzen? 220
9.6 Aufreinigungsverfahren für getaggte Proteine aus E. coli 221
9.6.1 Bakterienanzucht und Homogenisation 222
9.6.2 Weitere Aufreinigung des heterologen Proteins 224
10 Gelelektrophorese von Proteinen
10.1 Die Polyacrylamid- Gelelektrophorese (PAGE) 229
10.2 Die denaturierende SDS-PAGE 229
10.2.1 Herstellung eines Proteinextrakts für die SDS-Gelelektrophorese 229
10.2.2 Herstellen des Gels 232
10.2.3 Der Gellauf 235
10.3 Das Färben der Gele 237
10.4 Weitere Elektrophoreseverfahren für Proteine 239
10.4.1 Native PAGE 239
10.4.2 Isoelektrische Fokussierung 239
10.4.3 2-D-Gelelektrophorese 239
10.5 Western Blotting 241
10.6 MassenspektrometrischeVerfahren 246
11 Immunbiochemische Methoden
11.1 Antikörper 251
11.2 Prinzipien immunbiochemischer Verfahren 254
11.2.1 Immunpräzipitation 254
11.2.2 Trägerbasierte Immunfärbung 256
11.2.3 Immobilisierung des Antigens 257
11.2.4 Blocken überschüssiger Bindestellen 257
11.2.5 Detektion der Bindung 257
11.2.6 Antikörper-Kaskaden 259
11.2.7 Spezifische und unspezifische Bindungen 260
11.3 ELISA 261
11.3.1 Sandwich-ELISA 263
11.3.2 Kompetitiver ELISA 265
11.4 Immunfärbung nach Western Blot 266
11.5 Immunaffinitätschromatographie 269
11.6 Weitere Antikörperbasierte Methoden 270
11.6.1 Rekombinante Antikörper 270
11.6.2 Phage Display und scFv 271
11.6.3 Immunhistochemische Verfahren 273
11.6.4 Markierung von Zellen 274
12 Fortgeschrittene Verfahren
12.1 DNA-Sequenzierung 278
12.1.1 Sequenzierung nach Sanger 278
12.1.2 Herstellen von Proben für die DNA-Sequenzierung 280
12.2 Next Generation Sequenzierung 281
12.3 Von den „Omics“ zur Systembiologie 285
12.4 Analyse der Genfunktion 286
12.4.1 Reverse Genetik und Gene Targeting 286
12.4.2 RNAi 287
12.4.3 Durchführung von siRNA-Experimenten 288
12.5 Genom Editierung 289
13 Bioinformatik
13.1 Datenbanken 296
13.2 Dateiformate 298
13.3 Sequenzsuche anhand von Stichwörtern (Entrez) 300
13.4 Sequenzsuche mit einer Sequenz (BLAST) 300
13.5 Bioinformatik zur Planung der Laborarbeit 305
14 Anhang
A1 Sicherheit im Labor 308
A2 Die 10 goldenen Laborregeln 309
A3 Das Laborbuch und die finale Arbeit 311
Verzeichnis der „Gut zu wissen“-Boxen 313
Abbildungsverzeichnis 314
Verzeichnis der Maps 316
Verzeichnis der Protokolle 316
Tabellenverzeichnis 317
Abkürzungsverzeichnis 318
Sachverzeichnis 321
Quellenverzeichnis 328
Pressestimmen
Aus: ekz-Informationsdienst, Themelidis, ID bzw. IN 2011/08
Dieses Buch stellt die gängigsten molekularbiologischen Labormethoden gut verständlich dar. Es richtet sich an Bachelor- und Masterstudenten im Bereich der Lebenswissenschaften und vermittelt zum einen die Grundlagen der Laborarbeit, Aufreinigung von DNA, RNA und Proteinen, Polymerasekettenreaktion und Klonierungsstrategien und vieles mehr bis hin zu molekularbiologischen Methoden für Fortgeschrittene. Vergleichstitel hierzu sind "Der Experimentator: Molekularbiologie/Genomics" (ID 31/02) und "Gentechnische Methoden" (ID 15/00). Das vorliegende Buch ist gut strukturiert und eignet sich sehr gut für Bibliotheken an Hochschul- und Wissenschaftsstandorten.
Autoreninfo

Reinard, Thomas

Dr. Thomas Reinard lehrt an der Leibniz Universität Hannover. 
Leserbewertungen

Bewertungen

Grundlagen und Praxis

Bewertung

Kundenmeinung von Virginia B.

Das Lehrbuch fasst zunächst kurz einige biologische Grundlagen zusammen, deren Wissen beim Arbeiten in der Molekularbiologie unentbehrlich sind. Anschließend werden klassische Arbeitsgeräte erklärt um eine Basis für die Laborarbeit zu legen um die nachfolgenden Methoden damit durchzuführen. Es werden die am häufigsten genutzten und relevantesten Methoden der Molekularbiologie ausführlich erläutert. Zuletzt wird noch ein Einblick in die Bioinformatik gewährt, was insbesondere bei Forschungsarbeiten von Nutzen ist.

Die Ausführung der Texte ist gut verständlich und aufeinander aufbauend. Verweise werden sinnvoll eingesetzt. Bilder, Fotos und Tabellen unterstützen optimal, sodass der Inhalt leichter verständlich wird. Auch die zusätzlichen Tipps und die Protokollboxen, in welchen detaillierte Arbeitsschritte aufgeführt sind sind hilfreich für das Gesamtverständnis.

Ich empfehle das Lehrbuch gerne weiter, da es als gute Laborvorbereitung und auch als Nachschlagewerk dient. Daher ist es sowohl für Studenten der ersten Semester, als auch für Laboranten und Wiedereinsteiger geeignet. Außerdem stellt das Werk neben den blanken Methoden auch das notwendige Hintergrundwissen parat ohne nebenbei andere Bücher zur Rate ziehen zu müssen. Weiterhin ist es das ideale (Begleit-)Skript zur Vorlesung "Molekularbiologische Methoden".

Gute Übersicht der Molekularbiologischen Methoden

Bewertung

Kundenmeinung von Cornelia

Ich finde, dass dieses Buch eine gute Übersicht der Methoden gibt, die in den Feldern der Molekularbiologie und Life Sciences verwendet werden. Ich habe mir dieses Buch für mein Studium geholt und gehe davon aus, dass ich es auch danach weiterverwenden kann.

Anmerkung: Ich habe das Buch als eBook über die Seite des Verlags bestellt.

Ein sehr gutes Methodenbuch

Bewertung

Kundenmeinung von E Da Choi

I got this book for one of my studies in biology. This book has very clear and good explanations of the molecular biological methods used in labs.
There are also tips that would be helpful when you are actually working in a lab. This book consists of not just theory but actual information and methods that should be done. By reading this book, you can actually prevent your experiments go wrong, and even though it goes wrong, there are clear explanations of why it went wrong and how to prevent them.
I could really use and keep this book not just for my studies but also for later lab works.

This book is currently only in german, but I wish that the author also publish one in english.

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von D. Schniertshauer

Eine sehr gutes Buch, von der Einführung in gewisse experimentelle Ansätze bis hin zu fortschrittlichen Methoden des Laboralltags. Insbesondere die Rubrik "Gut zu Wissen" ist sehr schön ausgeführt.

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von S. Peys

Der Aufbau des Buches gefällt mir sehr. Von der Probenlagerung bis hin zu den verschiedenen Färbungen ist alles anschaulich und gut beschrieben als auch illustriert. Ganz besonders gefällt mir die Angabe von Protkollen für die Laborarbeit (sowohl zur eigenen Versuchsdurchführung als auch zum Verständnis).

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von M. Hartl

Guter Überblick über Biochemische Methoden verständlich präsentiert, praxisbezogen und auf das wesentliche fokussiert.

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von T. Rodat

Das Buch bietet sowohl einen ausreichend weiten als auch einen genügend vertiefenden Einblick in die Molekularbiologischen Methoden.
Der Autor versteht es dabei die einzelnen Methoden anschaulich zu beschreiben, als auch hilfreiche Tipps zu streuen, die das Arbeiten im Labor deutlich erleichtern.

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von D. Kostner

Ein ausgezeichnetes Buch für das praktische Arbeiten im Labor, bestens geeignet für Studenten und Doktoranden. Alle wichtigen Methoden werden ausführlich beschrieben, Hintergründe herausgearbeitet und praktische Tipps weitergegeben. Ein Muss für jeden der sich mit Molekularbiologie in der Praxis beschäftigt!

Hilfreich bei der Prüfungsvorbereitung

Bewertung

Kundenmeinung von Nicole Cichon

Nicht nur für Biologen oder die Arbeit im Labor, sondern auch sehr hilfreich bei der Vorbereitung für die Mikrobiologie-Prüfung der Tiermediziner, ist dieses Buch über mikrobiologische Methoden. Zu Beginn werden die Grundlagen der Genetik, die das Verständnis des Folgenden erleichtern, dargelegt. Die Methoden des Erregernachweises wie zum Beispiel PCR, ELISA und Western Blot werden leicht verständlich in kompakten Texten erklärt. In „Gut zu Wissen-“, „Protokoll-“ und „Tipp-“ Boxen werden Hintergründe, zusätzliche Informationen und praktische Tipps gegeben. Weitere zusätzliche Informationen finden sich im Online-Zusatzmaterial.
Dieses Buch kann ich als zusätzliches Nachschlagewerk für die Mikrobiologie empfehlen.

Dozentenbewertung

Bewertung

Kundenmeinung von A. Hallmann

Methodenbuch das die wichtigsten Methoden der Molekularbiologie kurz und gut beschreibt.
Hintergründe und Wirkmechanismen könnten aber noch besser beschrieben werden. Anschauliche Darstellungen.
Seite:
  1. 1
  2. 2
  3. 3

Artikel 1 bis 10 von 27 gesamt

Bewerten Sie den Titel "Molekularbiologische Methoden 2.0"

 
1 Stern
2 Sterne
3 Sterne
4 Sterne
5 Sterne
Bewertung
Produktfragen

Fragen zu Molekularbiologische Methoden 2.0

Es wurden bis jetzt noch keine Fragen gestellt.

Stellen Sie eine Frage

Molekularbiologische Methoden 2.0
 
  Lade...